Creeaza.com - informatii profesionale despre


Evidentiem nevoile sociale din educatie - Referate profesionale unice



Acasa » referate » chimie
Separarea aminoacizilor dintr-un amestec prin cromatografia pe hartie

Separarea aminoacizilor dintr-un amestec prin cromatografia pe hartie



Separarea aminoacizilor dintr-un amestec prin cromatografia  pe hartie

            1.Consideratii  generale

            Aminoacizii reprezinta unitatile chimice de baza care intra in alcatuirea structurii protidelor. Desi in natura se cunosc aproximativ 200 de aminoacizi, organismele utilizeaza un nr. restrans pentru biosinteza diferitelor tipuri de protide, aproximativ 20-22 de aminoacizi.

            Toti aminoacizii prezinta ca trasatura comuna existenta unei functii amina primara(-NH2) si a unei functii carboxil   (-COOH), ambele grefate la acelasi atom de carbon, denumit -a.

            Aminoacizi sunt substante amfotere, in solutie comportandu-se ca amfiioni, datorita disocierii gruparilor functionale carboxil si amina. Datorita caracterului lor amfoter, aminoacizii se comporta in mediu acid ca baze, disociind sub forma de cationi, iar in mediu bazic ca acizi, disociind sub forma de anioni.

 Principiu:

    Deoarece proteinele sunt alcatuite dintr-un amestec de diferiti aminoacizi in proportii diferite care caracterizeaza proteina respectiva, este important a cunoaste aminoacizii constituenti.

            Separarea si identificarea aminoacizilor constituenti  este posibila prin cromatografierea pe hartie a hidrolizatului proteic.

            In cromatografia pe hartie - care este o metoda de repartitie, se foloseste hartie de filtru imbibata si strabatuta de diferite amestecuri de solventi, de exemplu fenol - apa sau butanol - apa. Acestia determina aminoacizii adsorbiti de marginea de jos a hartiei de filtru sa se deplaseze de-a lungul ei cu viteze diferite, caracteristice fiecarui aminoacid, ocupand astfel pozitii diferite pe cromatograma. Deoarece aminoacizii sunt incolori, cromatograma necesita o reactie de culoare cu ninhidrina. Aminoacizii se prezinta in cromatograma sub forma de pete de dimensiuni diferite, cu intensitati diferite de culoare.

            Pentru identificarea fiecaruia in parte se face o cromatograma de comparatie, folosind cate un aminoacid cunoscut, astfel se poate cunoaste pozitia fiecarui aminoacid in cromatograma.

            Intrucat separarea si identificarea aminoacizilor din hidrolizate proteice necesita insusirea unei tehnici speciale, in lucrarea practica se vor separa amestecuri simple de aminoacizi cunoscuti.

 Experienta  Substante necesare:

amestec de 2 - 3 aminoacizi (1 mg / l ap  0,1%)

solutii de control de aminoacizi (1 mg/l)

amestec de developare butanol - acid acetic - apa 4:1:5

ninhidrina (0,1 - 0,2% in butanol)

hartie cromatografica Whatman nr. 1 (5/10 cm)

 Mod de lucru:

Pe o fasie de hartie de filtru se trage cu creionul o linie paralela cu unul din capete la o distanta de 2 cm de marginea hartiei.

Pe aceasta linie (linia de start) se aseaza cu o micropipeta cate o picatura din solutia de cercetat si din solutiile de control, din loc in loc, la circa 2 cm interval, notandu-se in prealabil locul fiecarei substante. Diametrul picaturilor trebuie sa fie de 2 - 3 mm, iar cantitatea maxima de aminoacizi intr-o pata injur de 0,03 mg. Hartia cu petele uscate in prealabil se introduce in camera de cromatografiere care contine un strat de amestec de developare de 2 - 3 mm grosime, astfel incat capatul pe care au fost pusi aminoacizii sa ajunga in acesta. Petele de aminoacizi nu trebuie sa intre in amestecul de developare. Se lasa un timp, pana cand frontul solventului ajunge la 2 cm de la marginea superioara a hartiei (developare ascendenta). Se scoate hartia, se noteaza cu creionul frontul solventului, se usuca in etuva la 1000C si se pulverizeaza cu ninhidrina. Se introduce 10 minute in etuva la 900C, apoi se observa pozitia si intensitatea culorii petelor aparute si se calculeaza Rf. Prin pulverizare cu o solutie de NiSO4  4% se pot proteja de decolorare cromatogramele revelate cu ninhidrina.

Rf =     distanta de la linia de start pana la pata

             distanta de la linia de start - front solvent

Valorile Rf ale catorva aminoacizi in conditiile experientei:

triptofan                      0,43                 arginina                       0,10    

alanina                        0,24                 histidina                      0,10

acid glutamic  0,17                 fenilalanina     0,53

cisteina                       0,08                 leucina                        0,61

glicocol                       0,17









Politica de confidentialitate

.com Copyright © 2019 - Toate drepturile rezervate.
Toate documentele au caracter informativ cu scop educational.


Proiecte

vezi toate proiectele
 PROIECT DE LECTIE Clasa: I Matematica - Adunarea si scaderea numerelor naturale de la 0 la 30, fara trecere peste ordin
 Proiect didactic Grupa: mijlocie - Consolidarea mersului in echilibru pe o linie trasata pe sol (30 cm)
 Redresor electronic automat pentru incarcarea bateriilor auto - proiect atestat
 Proiectarea instalatiilor de alimentare ale motoarelor cu aprindere prin scanteie cu carburator

Lucrari de diploma

vezi toate lucrarile de diploma
 Lucrare de diploma - eritrodermia psoriazica
 ACTIUNEA DIPLOMATICA A ROMANIEI LA CONFERINTA DE PACE DE LA PARIS (1946-1947)
 Proiect diploma Finante Banci - REALIZAREA INSPECTIEI FISCALE LA O SOCIETATE COMERCIALA
 Lucrare de diploma managementul firmei “diagnosticul si evaluarea firmei”

Lucrari licenta

vezi toate lucrarile de licenta
 CONTABILITATEA FINANCIARA TESTE GRILA LICENTA
 LUCRARE DE LICENTA - FACULTATEA DE EDUCATIE FIZICA SI SPORT
 Lucrare de licenta stiintele naturii siecologie - 'surse de poluare a clisurii dunarii”
 LUCRARE DE LICENTA - Gestiunea stocurilor de materii prime si materiale

Lucrari doctorat

vezi toate lucrarile de doctorat
 Doctorat - Modele dinamice de simulare ale accidentelor rutiere produse intre autovehicul si pieton
 Diagnosticul ecografic in unele afectiuni gastroduodenale si hepatobiliare la animalele de companie - TEZA DE DOCTORAT
 LUCRARE DE DOCTORAT ZOOTEHNIE - AMELIORARE - Estimarea valorii economice a caracterelor din obiectivul ameliorarii intr-o linie materna de porcine

Proiecte de atestat

vezi toate proiectele de atestat
 Proiect atestat informatica- Tehnician operator tehnica de calcul - Unitati de Stocare
 LUCRARE DE ATESTAT ELECTRONIST - TEHNICA DE CALCUL - Placa de baza
 ATESTAT PROFESIONAL LA INFORMATICA - programare FoxPro for Windows
 Proiect atestat tehnician in turism - carnaval la venezia




SPECTROMETRIA RADIATIILOR GAMMA
BROMURA DE ARGINT
LIPIDE. REACTII CARACTERISTICE
PROPRIETATILE SAPUNURILOR. DETERMINAREA GRADULUI DE RANCEZIRE AL UNEI GRASIMI
Legea a doua a termodinamicii – doua cicluri concurentiale
Efectul fotoelectric (fotoefectul)
Sulfati
Acid Salicilic


Termeni si conditii
Contact
Creeaza si tu