Creeaza.com - informatii profesionale despre


Evidentiem nevoile sociale din educatie - Referate profesionale unice
Acasa » referate » chimie
Separarea aminoacizilor dintr-un amestec prin cromatografia pe hartie

Separarea aminoacizilor dintr-un amestec prin cromatografia pe hartie




Separarea aminoacizilor dintr-un amestec prin cromatografia pe hartie

1.Consideratii generale

Aminoacizii reprezinta unitatile chimice de baza care intra in alcatuirea structurii protidelor. Desi in natura se cunosc aproximativ 200 de aminoacizi, organismele utilizeaza un nr. restrans pentru biosinteza diferitelor tipuri de protide, aproximativ 20-22 de aminoacizi.

Toti aminoacizii prezinta ca trasatura comuna existenta unei functii amina primara(-NH2) si a unei functii carboxil (-COOH), ambele grefate la acelasi atom de carbon, denumit -a

Aminoacizi sunt substante amfotere, in solutie comportandu-se ca amfiioni, datorita disocierii gruparilor functionale carboxil si amina. Datorita caracterului lor amfoter, aminoacizii se comporta in mediu acid ca baze, disociind sub forma de cationi, iar in mediu bazic ca acizi, disociind sub forma de anioni.

Principiu:

Deoarece proteinele sunt alcatuite dintr-un amestec de diferiti aminoacizi in proportii diferite care caracterizeaza proteina respectiva, este important a cunoaste aminoacizii constituenti.

Separarea si identificarea aminoacizilor constituenti este posibila prin cromatografierea pe hartie a hidrolizatului proteic.

In cromatografia pe hartie - care este o metoda de repartitie, se foloseste hartie de filtru imbibata si strabatuta de diferite amestecuri de solventi, de exemplu fenol - apa sau butanol - apa. Acestia determina aminoacizii adsorbiti de marginea de jos a hartiei de filtru sa se deplaseze de-a lungul ei cu viteze diferite, caracteristice fiecarui aminoacid, ocupand astfel pozitii diferite pe cromatograma. Deoarece aminoacizii sunt incolori, cromatograma necesita o reactie de culoare cu ninhidrina. Aminoacizii se prezinta in cromatograma sub forma de pete de dimensiuni diferite, cu intensitati diferite de culoare.

Pentru identificarea fiecaruia in parte se face o cromatograma de comparatie, folosind cate un aminoacid cunoscut, astfel se poate cunoaste pozitia fiecarui aminoacid in cromatograma.

Intrucat separarea si identificarea aminoacizilor din hidrolizate proteice necesita insusirea unei tehnici speciale, in lucrarea practica se vor separa amestecuri simple de aminoacizi cunoscuti.

Experienta Substante necesare:

amestec de 2 - 3 aminoacizi (1 mg / l ap 0,1%)

solutii de control de aminoacizi (1 mg/l)

amestec de developare butanol - acid acetic - apa 4:1:5



ninhidrina (0,1 - 0,2% in butanol)

hartie cromatografica Whatman nr. 1 (5/10 cm)

Mod de lucru:

Pe o fasie de hartie de filtru se trage cu creionul o linie paralela cu unul din capete la o distanta de 2 cm de marginea hartiei.

Pe aceasta linie (linia de start) se aseaza cu o micropipeta cate o picatura din solutia de cercetat si din solutiile de control, din loc in loc, la circa 2 cm interval, notandu-se in prealabil locul fiecarei substante. Diametrul picaturilor trebuie sa fie de 2 - 3 mm, iar cantitatea maxima de aminoacizi intr-o pata injur de 0,03 mg. Hartia cu petele uscate in prealabil se introduce in camera de cromatografiere care contine un strat de amestec de developare de 2 - 3 mm grosime, astfel incat capatul pe care au fost pusi aminoacizii sa ajunga in acesta. Petele de aminoacizi nu trebuie sa intre in amestecul de developare. Se lasa un timp, pana cand frontul solventului ajunge la 2 cm de la marginea superioara a hartiei (developare ascendenta). Se scoate hartia, se noteaza cu creionul frontul solventului, se usuca in etuva la 1000C si se pulverizeaza cu ninhidrina. Se introduce 10 minute in etuva la 900C, apoi se observa pozitia si intensitatea culorii petelor aparute si se calculeaza Rf. Prin pulverizare cu o solutie de NiSO4 4% se pot proteja de decolorare cromatogramele revelate cu ninhidrina.

Rf = distanta de la linia de start pana la pata

distanta de la linia de start - front solvent

Valorile Rf ale catorva aminoacizi in conditiile experientei:

triptofan 0,43 arginina 0,10

alanina 0,24 histidina 0,10

acid glutamic 0,17 fenilalanina 0,53

cisteina 0,08 leucina 0,61

glicocol 0,17







Politica de confidentialitate







creeaza logo.com Copyright © 2023 - Toate drepturile rezervate.
Toate documentele au caracter informativ cu scop educational.


Proiecte

vezi toate proiectele
PROIECT DE LECTIE CLASA A II-A, Educatie plastica, Tehnica marmorata
PROIECT DIDACTIC 5-7 ani activitate matematica - „Cum este si cum nu este aceasta piesa”
Proiect Circuite Digitale
Organizarea si conducerea procesului tehnologic proiectat

Lucrari de diploma

vezi toate lucrarile de diploma
LUCRARE DE DIPLOMA - Rolul asistentului medical in ingrijirea pacientului cu A.V.C.
Spatiul romanesc, intre diplomatie si conflict in Evul Mediu
Lucrare de diploma managementul firmei “diagnosticul si evaluarea firmei”
Lucrare de diploma Facultatea de Textile – Pielarie - Tehnologia confectiilor din piele si inlocuitori - PROIECTAREA CONSTRUCTIV TEHNOLOGICA A UNUI PR

Lucrari licenta

vezi toate lucrarile de licenta
Lucrare de licenta contabilitate si informatica de gestiune - politici si tratamente contabile privind leasingul (ias 17). prevalenta economicului asupra juridicului
Lucrare de licenta educatie fizica si sport - sistemul de selectie in jocul de handbal pentru copii de 10-11 ani in concordanta cu cerintele handbalul
Lucrare de licenta - cercetare si analiza financiara asupra deseurilor de ambalaje la sc.ambalaje sa
LUCRARE DE LICENTA - Asigurarea calitatii la firma Trans

Lucrari doctorat

vezi toate lucrarile de doctorat
Diagnosticul ecografic in unele afectiuni gastroduodenale si hepatobiliare la animalele de companie - TEZA DE DOCTORAT
Doctorat - Modele dinamice de simulare ale accidentelor rutiere produse intre autovehicul si pieton
LUCRARE DE DOCTORAT ZOOTEHNIE - AMELIORARE - Estimarea valorii economice a caracterelor din obiectivul ameliorarii intr-o linie materna de porcine

Proiecte de atestat

vezi toate proiectele de atestat
Lucrare atestat informatica - „administrarea gradinii botanice”
Lucrare atestat Tehnician operator tehnica de calcul - Sursa de tensiune cu tranzistoare npn
ATESTAT PROFESIONAL LA INFORMATICA - programare FoxPro for Windows
Proiect atestat tehnician in turism - carnaval la venezia

SPECTROMETRIA RADIATIILOR GAMMA
BROMURA DE ARGINT
LIPIDE. REACTII CARACTERISTICE
PROPRIETATILE SAPUNURILOR. DETERMINAREA GRADULUI DE RANCEZIRE AL UNEI GRASIMI
Legea a doua a termodinamicii - doua cicluri concurentiale
Efectul fotoelectric (fotoefectul)
Sulfati
Acid Salicilic



Termeni si conditii
Contact
Creeaza si tu